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怎么判定是否需要pcr实验室?PCR实验室各区之间的功能有何不同

人气:139 ℃/2024-01-30 11:58:33

PCR实验室原则上分为试剂准备区、样品制备区、扩增区和扩增产物分析区四个单独的工作区域,并设有专用走廊,各工作区域应设缓冲间,工作区与缓冲间宜安装连锁装置。同功能的工作区应是分隔独立的,各工作区有明显的标志,不能直通,如果紧密连接,安装物品传递窗。

一、各区域之间功能介绍

1.试剂准备区:主要进行试剂的制备,分装和主反应混合液的制备。试剂盒用于样品制作的材料应直接运送至该区域。试剂原材料必须贮存在本区内,并在本区内制备成所需的试剂。本区主要设备有天平、冰箱、离心机、加样器、振荡器等。对于气流压力的控制,本区并没有严格的要求,一般为 10Pa。

2.样品制备区:主要进行样品的保存,核酸提取,贮存及期入至扩增反应管和测定DNA的合成。本区主要设备有冰箱、生物安全柜、离心机、加样器、振荡器等。本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为正压,以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染, 一般为 10Pa。

3.扩增区:主要进行DNA的扩增。此外,已制备的DNA模板的加入和主反应混合液(来自试剂准备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。本区主要设备有:扩增仪、冰箱、离心机、加样器等。本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为负压,为避免气溶从本区漏出,一般为-25Pa。

4.扩增产物分析区:主要进行扩增产物的测定。本区主要设备有酶标仪,洗板机.加样器和水浴箱等。本区的压力梯度的要求为:相对于邻近区域为负压,一般为-25Pa,以避免扩增产物从本区扩散至其它区域。

二、PCR实验室通风系统及压力控制

各区域之间应具备单间的实验工艺流、物流、人流与气流,形成单向流程的保护屏障,避免实验室之间的相互干扰,防止气溶胶扩散对实验过程造成污染。PCR实验室并没有严格的净化要求,但是为避免各个实验区域交叉污染的可能性,宜采用全送全排的气流组织形式,严格控制送,排风的比例以保证个实验区的压力要求。

几个区域的大小设置情况,试剂准备区、扩增区、扩增产物分析区的空间可以相对小一些,样品制备区要放置生物安全柜和低温冰箱,空间应大一 些。试剂准备区和样品制备区设紧急洗眼器,以保证操作人员的安全。

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